pCold II

产物信息
基本信息
质粒介绍
质粒图谱
质粒序列

产物信息

产物货号	产物名称	产物规格	优惠价
XY0073	pCold II	5μ驳	?请询价

使用说明

信裕质粒平台的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证，如存在质量问题，请在收到产物的三个月内通知我司。收到质粒后请短暂离心，加入20μl ddH2O溶解质粒，取2μl转化至对应感受态中，挑取单克隆重新提取质粒后使用。如需获取其他详细信息请登录我司官网查询。

基本信息

启动子:	CspA promoter
复制子:	Ori,F1 ori
质粒分类:	大肠系列质粒；大肠表达质粒；辫颁辞濒诲系列质粒
质粒大小:	4392bp
质粒标签:	N-His
原核抗性:	氨苄青霉素础尘辫（100μ驳/尘濒）
克隆菌株:	顿贬5α等大肠杆菌
培养条件:	37℃，有氧，尝叠
表达宿主:	叠尝21等大肠杆菌
培养条件:	37℃，有氧，尝叠
诱导方式:	滨笔罢骋或乳糖及其类似物
5'测序引物:	辫颁辞濒诲-贵（础颁骋颁颁础罢础罢颁骋颁颁骋础础础骋骋）
3'测序引物:	辫颁辞濒诲-搁（骋骋颁础骋骋骋础罢颁罢罢础骋础罢罢颁罢骋）
备注:	冷休克蛋白表达载体

质粒介绍

当培养的大肠杆菌的温度充分降低，几乎暂时停止生长大部分的蛋白表达减少，而此时一组蛋白质称为“冷休克蛋白”被专门诱导表达。冷休克表达载体，pCold I-IV，是利用冷休克基因CSPA启动子设计高效率蛋白质表达载体。 CSPA的启动子的下游处，插入了lac操纵子，以便严格控制表达。此外，5'非翻译区（5'UTR），翻译增强元件（TEE），His标签序列，Xa因子切割位点和多克隆位点（MCS）位于在CSPA启动子的下游的。由于该产物采用了大肠杆菌的启动子，大多数大肠杆菌菌株可被用作表达宿主。有四种类型的 pCold载体，他们的下列原件的位置稍有不同，TEE，His标签序列和Factor XA酶切位点。
pColdII质粒是利用冷休克基因CSPA启动子设计高效率蛋白质表达载体。在E.COLI启动子下游处，插入了lac操纵子，以便严格控制表达。此外，5’非翻译区（5’UTR），翻译增强元件（TEE）,His标签序列，Xa因子切割位点和多克隆位点（MCS）位于CAPS启动子的下游。当培养温度切换到低温时，大肠杆菌暂时停止生长，大部分的大肠杆菌蛋白质表达减少，但是一类称为冷休克蛋白的蛋白质被特异性诱导表达。

质粒图谱

质粒序列

LOCUS       Exported                4392 bp ds-DNA     circular SYN 13-SEP-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
KEYWORDS    Untitled 4
SOURCE      synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE   1 (bases 1 to 4392)
TITLE     Direct Submission
JOURNAL   Exported Tuesday, September 13, 2016 from MiaoLingPlasmid
            http://www.miaolingbio.com
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..4392
                     /organism="synthetic DNA construct"
                     /mol_type="other DNA"
     protein_bind    84..100
                     /bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
                     /note="lac operator"
                     /note="The lac repressor binds to the lac operator to
                     inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
                     relieved by adding lactose or
                     isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
     CDS             271..288
                     /codon_start=1
                     /product="6xHis affinity tag"
                     /note="6xHis"
                     /translation="HHHHHH"
     rep_origin      complement(696..1151)
                     /direction=LEFT
                     /note="f1 ori"
                     /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
                     indicates direction of (+) strand synthesis"
     promoter        1251..1355
                     /gene="bla"
                     /note="AmpR promoter"
     CDS             1356..2216
                     /codon_start=1
                     /gene="bla"
                     /product="beta-lactamase"
                     /note="AmpR"
                     /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
                     related antibiotics"
                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
                     ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
                     PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
                     EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
                     LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
                     LIKHW"
     rep_origin      2387..2975
                     /direction=RIGHT
                     /note="ori"
                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
                     replication"
     CDS             complement(3147..4229)
                     /codon_start=1
                     /gene="lacI"
                     /product="lac repressor"
                     /note="lacI"
                     /note="The lac repressor binds to the lac operator to
                     inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
                     relieved by adding lactose or
                     isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
                     /translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAEL
                     NYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERSGV
                     EACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSIIFSH
                     EDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREGDWSA
                     MSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDTEDSSC
                     YIPPLTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNTQTASPR
                     ALADSLMQLARQVSRLESGQ"
     promoter        complement(4230..4307)
                     /gene="lacI"
                     /note="lacI promoter"
ORIGIN
        1 aaggaatggt gtggccgatt aatcataaat atgaaaaata attgttgcat cacccgccaa
       61 tgcgtggctt aatgcacatc aaattgtgag cggataacaa tttgatgtgc tagcgcatat
      121 ccagtgtagt aaggcaagtc ccttcaagag ttatcgttga tacccctcgt agtgcacatt
      181 cctttaacgc ttcaaaatct gtaaagcacg ccatatcgcc gaaaggcaca cttaattatt
      241 aagaggtaat acaccatgaa tcacaaagtg catcatcatc atcatcatat ggagctcggt
      301 accctcgagg gatccgaatt caagcttgtc gacctgcagt ctagataggt aatctctgct
      361 taaaagcaca gaatctaaga tccctgccat ttggcgggga tttttttatt tgttttcagg
      421 aaataaataa tcgatcgcgt aataaaatct attattattt ttgtgaagaa taaatttggg
      481 tgcaatgaga atgcgcaggc cctttcgtct cgcgcgtttc ggtgatgacg gtgaaaacct
      541 ctgacacatg cagctcccgg agacggtcac agcttgtctg taagcggatg ccgggagcag
      601 acaagcccgt cagggcgcgt cagcgggtgt tggcgggtgt cggggctggc ttaactatgc
      661 ggcatcagag cagattgtac tgagagtgca ccataaaatt gtaaacgtta atattttgtt
      721 aaaattcgcg ttaaattttt gttaaatcag ctcatttttt aaccaatagg ccgaaatcgg
      781 caaaatccct tataaatcaa aagaatagcc cgagataggg ttgagtgttg ttccagtttg
      841 gaacaagagt ccactattaa agaacgtgga ctccaacgtc aaagggcgaa aaaccgtcta
      901 tcagggcgat ggcccactac gtgaaccatc acccaaatca agttttttgg ggtcgaggtg
      961 ccgtaaagca ctaaatcgga accctaaagg gagcccccga tttagagctt gacggggaaa
     1021 gccggcgaac gtggcgagaa aggaagggaa gaaagcgaaa ggagcgggcg ctagggcgct
     1081 ggcaagtgta gcggtcacgc tgcgcgtaac caccacaccc gccgcgctta atgcgccgct
     1141 acagggcgcg tactatggtt gctttgacgt atgcggtgtg aaataccgca cagatgcgta
     1201 aggagaaaat accgcatcag gcgtcaggtg gcacttttcg gggaaatgtg cgcggaaccc
     1261 ctatttgttt atttttctaa atacattcaa atatgtatcc gctcatgaga caataaccct
     1321 gataaatgct tcaataatat tgaaaaagga agagtatgag tattcaacat ttccgtgtcg
     1381 cccttattcc cttttttgcg gcattttgcc ttcctgtttt tgctcaccca gaaacgctgg
     1441 tgaaagtaaa agatgctgaa gatcagttgg gtgcacgagt gggttacatc gaactggatc
     1501 tcaacagcgg taagatcctt gagagttttc gccccgaaga acgttttcca atgatgagca
     1561 cttttaaagt tctgctatgt ggcgcggtat tatcccgtat tgacgccggg caagagcaac
     1621 tcggtcgccg catacactat tctcagaatg acttggttga gtactcacca gtcacagaaa
     1681 agcatcttac ggatggcatg acagtaagag aattatgcag tgctgccata accatgagtg
     1741 ataacactgc ggccaactta cttctgacaa cgatcggagg accgaaggag ctaaccgctt
     1801 ttttgcacaa catgggggat catgtaactc gccttgatcg ttgggaaccg gagctgaatg
     1861 aagccatacc aaacgacgag cgtgacacca cgatgcctgt agcaatggca acaacgttgc
     1921 gcaaactatt aactggcgaa ctacttactc tagcttcccg gcaacaatta atagactgga
     1981 tggaggcgga taaagttgca ggaccacttc tgcgctcggc ccttccggct ggctggttta
     2041 ttgctgataa atctggagcc ggtgagcgtg ggtctcgcgg tatcattgca gcactggggc
     2101 cagatggtaa gccctcccgt atcgtagtta tctacacgac ggggagtcag gcaactatgg
     2161 atgaacgaaa tagacagatc gctgagatag gtgcctcact gattaagcat tggtaactgt
     2221 cagaccaagt ttactcatat atactttaga ttgatttaaa acttcatttt taatttaaaa
     2281 ggatctaggt gaagatcctt tttgataatc tcatgaccaa aatcccttaa cgtgagtttt
     2341 cgttccactg agcgtcagac cccgtagaaa agatcaaagg atcttcttga gatccttttt
     2401 ttctgcgcgt aatctgctgc ttgcaaacaa aaaaaccacc gctaccagcg gtggtttgtt
     2461 tgccggatca agagctacca actctttttc cgaaggtaac tggcttcagc agagcgcaga
     2521 taccaaatac tgttcttcta gtgtagccgt agttaggcca ccacttcaag aactctgtag
     2581 caccgcctac atacctcgct ctgctaatcc tgttaccagt ggctgctgcc agtggcgata
     2641 agtcgtgtct taccgggttg gactcaagac gatagttacc ggataaggcg cagcggtcgg
     2701 gctgaacggg gggttcgtgc acacagccca gcttggagcg aacgacctac accgaactga
     2761 gatacctaca gcgtgagcta tgagaaagcg ccacgcttcc cgaagggaga aaggcggaca
     2821 ggtatccggt aagcggcagg gtcggaacag gagagcgcac gagggagctt ccagggggaa
     2881 acgcctggta tctttatagt cctgtcgggt ttcgccacct ctgacttgag cgtcgatttt
     2941 tgtgatgctc gtcagggggg cggagcctat ggaaaaacgc cagcaacgcg gcctttttac
     3001 ggttcctggc cttttgctgg ccttttgctc acatagtcat gccccgcgcc caccggaagg
     3061 agctgactgg gttgaaggct ctcaagggca tcggtcgaga tcccggtgcc taatgagtga
     3121 gctaacttac attaattgcg ttgcgctcac tgcccgcttt ccagtcggga aacctgtcgt
     3181 gccagctgca ttaatgaatc ggccaacgcg cggggagagg cggtttgcgt attgggcgcc
     3241 agggtggttt ttcttttcac cagtgagacg ggcaacagct gattgccctt caccgcctgg
     3301 ccctgagaga gttgcagcaa gcggtccacg ctggtttgcc ccagcaggcg aaaatcctgt
     3361 ttgatggtgg ttaacggcgg gatataacat gagctgtctt cggtatcgtc gtatcccact
     3421 accgagatat ccgcaccaac gcgcagcccg gactcggtaa tggcgcgcat tgcgcccagc
     3481 gccatctgat cgttggcaac cagcatcgca gtgggaacga tgccctcatt cagcatttgc
     3541 atggtttgtt gaaaaccgga catggcactc cagtcgcctt cccgttccgc tatcggctga
     3601 atttgattgc gagtgagata tttatgccag ccagccagac gcagacgcgc cgagacagaa
     3661 cttaatgggc ccgctaacag cgcgatttgc tggtgaccca atgcgaccag atgctccacg
     3721 cccagtcgcg taccgtcttc atgggagaaa ataatactgt tgatgggtgt ctggtcagag
     3781 acatcaagaa ataacgccgg aacattagtg caggcagctt ccacagcaat ggcatcctgg
     3841 tcatccagcg gatagttaat gatcagccca ctgacgcgtt gcgcgagaag attgtgcacc
     3901 gccgctttac aggcttcgac gccgcttcgt tctaccatcg acaccaccac gctggcaccc
     3961 agttgatcgg cgcgagattt aatcgccgcg acaatttgcg acggcgcgtg cagggccaga
     4021 ctggaggtgg caacgccaat cagcaacgac tgtttgcccg ccagttgttg tgccacgcgg
     4081 ttgggaatgt aattcagctc cgccatcgcc gcttccactt tttcccgcgt tttcgcagaa
     4141 acgtggctgg cctggttcac cacgcgggaa acggtctgat aagagacacc ggcatactct
     4201 gcgacatcgt ataacgttac tggtttcaca ttcaccaccc tgaattgact ctcttccggg
     4261 cgctatcatg ccataccgcg aaaggttttg cgccattcga tggtgtccgg gatctcgacg
     4321 ctctccctta tgcgactcct gcattaggaa gcagcccagt agtaggttga ggccgttgag
     4381 caccgccgcc gc
//

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